蜘蛛体长从0.05毫米到60毫米不等。身体分头胸部和腹部。部分种类头胸部背面有胸甲（有的没有），头胸部前端通常有8个 单眼（也有6个、4个、2个、0个的），排成2～4行。腹面有一片大的胸板，胸板前方两个额叶中间有下唇。腹部不分节，腹柄由第1腹节（第7体节）演变而来。腹部多为圆形或卵圆形，有的具各种突起，形状奇特。腹部腹面纺器由 附肢演变而来，少数原始的种类有8个，位置稍靠前；大多数种类6个 纺器，位于体后端肛门的前方；还有部分种类具4个纺器，纺器上有许多纺管，内连各种丝腺，由纺管纺出丝。感觉器官有眼、各种感觉毛、听毛、琴形器和跗节器。
蜘蛛体外被几丁质外骨骼，身体明显地分为头胸部及腹部，二者之间往往有腹部第一腹节变成的细柄相连接，无尾节或尾鞭。蜘蛛无复眼，头胸部有附肢6对，第一、二对属头部附肢，其中第一对为 螯肢多为2节，基部膨大部分为螯节，端部尖细部分为螯牙，牙为管状，螯节内或头胸部内有 毒腺，其分泌的毒液即由此导出。第二对附肢称为脚须，形如步足，但只具6节，基节近口部形成颚状突起，可助摄食，雌蛛末节无大变化，而雄蛛脚须末节则特化为 生殖辅助器官，具有储精、传精结构，称触肢器。第三至六对附肢为步足，由7节组成，末端有爪，爪下还有硬毛一丛，故适于在光滑的物体上爬行。
蜘蛛大部分都有毒腺， 螯肢和螯爪的活动方式有两种类型，穴居蜘蛛大多都是上下活动，在地面游猎和空中结网的蜘蛛，则如钳子一般的横扫。
无触角，无翅，无复眼，只有单眼，一般有8个眼，但亦有6、4、2眼者，个别属甚至没有眼，就眼的色泽和功能而言，又分夜和昼两种。
蜘蛛的 口器，由螯肢、触肢茎节的颚叶，上唇、下唇所组成，具有毒杀、捕捉、压碎食物，吮吸液汁的功能。
有些蜘蛛的跗节爪下，有由粘毛组成的毛簇，毛簇有使蜘蛛在垂直的光滑物体上爬行的能力。结网的蜘蛛，跗节近顶端有几根爪状的刺，称为副爪。
大多数蜘蛛的腹部不分节。有无外雌器（称生殖厣）是鉴定雌体种的重要特征。在腹部腹面中间或腹面后端具有特殊的 纺绩器，三对纺绩器按其着生位置，称为前、中、后纺绩器，纺绩器的顶端有膜质的纺管，周围被毛，不同蜘蛛的纺管数目不同，不同形状的纺管，纺出不同的蛛丝，纺管的筛器，也是纺丝器官，像隆头蛛科的线纹帽头蛛的筛器上有9600个纺管，可见其纺出的丝是极其纤细的。经由纺管引出体外的丝腺有8种，丝腺的大小及数目随蜘蛛的成长和逐次蜕皮而增加。 蜘蛛丝是一种骨蛋白，十分粘细坚韧而具弹性，吐出后遇空气而变硬。
雌雄异体，雄体小于雌体，雄体触肢跗节发育成为触肢器，雌体于最后一次蜕皮后具有外雌器。
步足3对，分基节、转节、腿节、膝节、胫节、后跗节、跗节和跗端节（上 具爪）。步足上覆刚毛，并具数种感觉器官，如细长的盅毛（感受气流和振动）。步足自割后，下次蜕皮时可再生。单眼8个或8个以下。某些足肌及腭肌附著于头胸部的胸内骨上。头胸部与腹部之间有纤细的腹柄相连。因腹柄的存在，纺器纺丝时腹部可自由摆动。神经系统完全集中于头胸部，咽上有脑（咽上神经节），尚有食管下 神经节。裂缝感觉器官散布于身体或位于足关节附近，用以司振动觉或听觉等。
腹部不分节，有消化系统、 心脏、生殖器官和 丝腺。进食时先吐出消化液，进行体外消化，再吸入液化的食物。兼具 书肺及气管，但直腭亚目只有书肺，合腭类仅具气管。除蟱蛛科外都有 毒腺，位於 螯肢内或背甲下方，毒腺管经过螯肢开口于螯牙末端附近，毒腺可能起源于一种辅助消化腺。许多种蜘蛛的毒腺分泌物全是消化酶，有的种分泌物能制服捕获物，甚至对抗掠食动物（包括脊
椎动物）。寇蛛属（Latrodectus）的寡妇蛛，尤其是 黑寡妇（L. mactans）的 毒液含神经毒，且叮咬甚痛。黑寡妇常倒悬于网上，体色黑，腹部有红色沙漏形纹，并常有一红色条纹。棕隐士蛛（Loxosceles reclusa）叮咬后引起局部坏死。蛛丝的化学成分与昆虫的丝相似，均为丝心蛋白。丝腺可能来自排泄器官，共有6类。各类丝腺产生不同类型的丝，泡状腺产生的丝用来束缚猎物，壶腹状腺产生蛛网螺旋的黏性小球，圆粒形腺的丝构成 卵囊，雄蛛胃上丝腺的丝从腹部书肺间的吐丝管排出，覆于精滴表面。原始的Mesothelae科仅有2种丝腺，但 圆蛛有6种。纺绩突系变态的附肢，1～4对（第10及11腹节各两对），多数有3对，而前排中间一对消失，或退化为无功能的舌状体或平板状的筛器，上有数千个吐丝管开口。
据文献记载，全世界的蜘蛛已知有3821属42055种（2010年），中国记载约3000种（截至2007年11月）。共有14个目，已有5个目绝灭了种群。分属于66个科，我国已发现7个目，在我国生存的有39科。
阴阳平衡